曦和维帧
我发现我的细胞总是刚复苏的时候状态很好,一传完代就长的奇形怪状的了,求同样HK-2细胞的同行帮我分析一下!(刚复苏完的细胞,17代,小小圆圆的)
(传代后的细胞,变长条形了)
我自己怀疑可能是,胰酶消化的时间太长,但是不太确定,恳请各位同行老师帮我看看是什么原因。
(这个细胞很难消化下来,我一般用1/3的0.25%胰酶放在培养箱中消化2min,再培养箱频率很高地外轻拍1-2min才能消化下来。之前曾尝试过在培养箱里放2min后直接拿出来加培养基停止消化,但发现冲培养瓶底部60次以上还有约1/3的细胞仍处于贴壁状态)
细胞博士
感觉刚复苏的时候,细胞状态就不是特别理想。有可能是存在隐性的污染。如果细胞无法增殖,小黑点不断增多,建议考虑重新引进细胞。
c_Yeats
明显有污染啊。。支原体检测下看看。
BudPlum
仔细看你的背景有小点点了,应该考虑是否有细菌或者支原体污染。细菌是放大后能看到有小虫子在动,支原体看不见,不过细胞会被裂解成碎片。
丁香园张医生
缩短一下胰酶消化的时间,细胞密度在高一点点
dxyc42u
细胞密度没啥问题,应该就是胰酶消化时间太长了
土井挞克树
你把胰酶消化的时间缩短,然后细胞密度降低就会好一些。