dxy_10tgor56
1.做植物的细胞悬浮一定要得到单细胞吗?较小的细胞团不可以吗?
2.如果要得到单细胞,纤维素酶和果胶酶哪种好,还是混合使用好,大概多少量合适呢?
3.悬浮培养物褐变严重,加维生素C可以吗?
4.对于悬浮培养物,如何收集植物单细胞,用单细胞悬液进行下一步组织培养?
5.对于不能高温灭菌的酶液,只经过0.22um滤膜能达到无菌培养吗?
6.对于悬浮液PH的调定,有没有较好的方法。我采用了灭菌前和灭菌后用PH计调定,效果都不太好。灭菌前调定,高温高压灭菌后,PH降低值每瓶有差异;灭菌后,染菌风险太高。
问题有点多,还请大家不吝赐教,先谢谢大家了。
灵枢天问
不一定要单细胞,细胞团也可以但是要尽量小,从愈伤组织得到分散细胞用果胶酶比较好
Topmicro
对于问题5.不能灭菌的酶液采用0.22微米滤膜过滤除菌没有问题,不放心的话可以过滤两次。6.如果每瓶的体积都一样的话ph变化应该是相同的,可以只打开一瓶边测边调,记清楚酸碱用量,其他的就不用测量直接加等量的酸碱就可以。另一种方法就是用开水洗两遍ph计套头,但是这种染菌方法风险比较大。
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植物的细胞悬浮一定要得到单细胞、较小的细胞团不一定不行、悬浮培养物褐变严重,加维生素C是可以的
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