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噬菌体效价测定出现了一些问题,寻求各位帮助?

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在实验过程中,通过对噬菌体进行多倍梯度稀释,目前是稀释了10的12次方倍,然后100微升的噬菌体,加入到500微升的大肠杆菌里面,培养30min后通过半固体平板混匀,倒在固体平板上,培养12h。

问题有几个:

①同一噬菌体,同一浓度,出现有噬菌斑和无噬菌斑,并且有浓度高的没出噬菌斑,低的缺出现了

②部分平板很澄清,也没有长菌或者只上了一些菌,是不是有噬菌体,但是浓度不够

③上面长的都是菌的是不是没有噬菌体

希望各位前辈可以给我提一些意见,帮助我改进一下我的实验方案,取得更好的实验结果,谢谢各位前辈了

 

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