科研好运女神降临
我的实验卡在接毒两个月了,请问有没有做过病毒接毒细胞方面的同学帮我一下,我用带病毒的粪便悬液接毒细胞,细胞1.5小时即出现大量死亡,后面盲传了1-2代,核酸阴性,胶体金也是阴性,我怀疑病毒还没有进入细胞,细胞就已经死亡。请问可能是粪便里的什么物质导致的呀?图一是病变图。图二是正常细胞图。
我怀疑支原体,但是觉得又不太像。
loveliufudan
从您提供的信息来看,可能有多种原因导致细胞的死亡,需要进一步的实验和检测来确认。以下是一些可能的原因:
病毒负荷过高或细胞对病毒过于敏感,导致细胞直接死亡。
病毒感染后产生的细胞毒素或炎症因子导致细胞死亡。
您使用的粪便悬液中可能含有其他致病微生物或毒素,这些物质也可能导致细胞死亡。
您使用的细胞可能存在问题,例如感染了其他微生物或受到了细胞培养不当等因素的影响。
针对这些问题,您可以考虑进行以下实验或检测:
检测病毒的负荷和活性,并进行合适的稀释后再接种细胞。
检测细胞培养上清中的毒素或炎症因子,以及细胞本身的状态。
进一步检测粪便悬液中是否存在其他致病微生物或毒素,例如进行细菌和真菌的培养,或者进行毒素检测。
检查您使用的细胞是否存在问题,例如进行细胞表型分析或核酸测序。
至于选择什么样的内部参照基因,需要根据您的实验设计和研究对象来确定,除了GAPDH,您还可以考虑其他常用的内参基因,例如ACTB,B2M等。一般来说,选择内部参照基因时,需要确保其表达量稳定,不会受到实验条件的影响。
土井挞克树
考虑还是病毒感染,目前的培养基不建议使用了。
huarenqiang5
主要考虑是支原体或细菌污染所导致的。