transwell试验细胞计数

丁香实验

2021-12-07

本人在做transwell侵袭试验，采用24孔板以及配套的transwell小室，小室内预铺稀释的matrigell基质胶，待胶干后铺HUVEC（脐静脉内皮）细胞，待细胞长至完全融合（显微镜下不能精确判断融合情况，如何判断？------1）后，小室内铺白血病（铺时要不要吸弃原来HUVEC的培养基？------2），培养12-24小时后，计数下室的白血病细胞，试验设置各种处理的白血病细胞作为对照，根据下室的细胞计数判断侵袭迁移能力，请教：实验室条件有限的情况下，下室细胞如何准确的计数？----3

1 个回答

丁香实验

2021-12-07

有帮助

1. 一般会用相同的面积孔板，摸索24小时长满的细胞的接种量。
2. 铺时，吸掉原来的培养基，我们做侵袭实验时，两种细胞所用的培养基不一样。
3. 上室细胞背面计数：先用4%聚甲醛固定，清洗后，用吉姆萨染色，染色后，就能在显微镜下选择10个视野进行计数。