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细菌耐药性检测方法一般包括涂片检测、细菌培养检测等。
静心观照
建立耐药模型的评价方法主要有以下两种:耐药倍数的检测;耐药相关蛋白的检测。
MTT、 CellTiter-Glo 发光法(CTG)测定药物对亲本细胞和耐药细胞的 IC50,计算耐药指数(RI)。
用 SPSS 软件计算半数抑制率(IC50)值,根据 IC50 值计算出耐药指数(resistance index, RI),RI=耐药细胞系的 IC50/亲代细胞系的 IC50,RI>5 则认为耐药细胞系的耐药性符合耐药株的要求。
WB、PCR、流式细胞、免疫学等多项方法检测耐药相关蛋白的表达情况。常用作检测指标的耐药相关蛋白主要有 P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药蛋白1(MDR1)。MDR 发生的机制十分复杂,其中,多药耐药基因 MDR 编码的 P-糖蛋白高表达是耐药的主要机制。
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CCK8或者MTT都可以看细胞耐药性
于小鱼鱼1998
目前关于对细菌耐药性的检测主要有以下几种方法:细菌耐药表型的检测(包括耐药筛选试验、折点敏感试验及药敏试验的仪器化和自动化等),β-内酰胺酶检测,特殊耐药菌检测和耐药基因检测等。其中最为直观的检测方法是以体外培养的药物检测
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细菌耐药性检测方法一般包括涂片检测、细菌培养检测等。 细菌培养检测就是取标本在培养基上均匀分布, 然后培养细菌,继而可以通过显微镜的镜检判断是哪一种细菌。涂片检测是用痰液直接做成标本,通过显微镜检查来观察里面成分的成分的检查项目。
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细胞耐药性是指细胞对药物产生一定程度的抵抗能力,使得原本对药物敏感的细胞在接触药物后不再对其产生预期的效果。检测细胞耐药性对于研究药物治疗的有效性以及开发新的抗癌药物等方面具有重要意义。以下是一些常见的检测细胞耐药性的方法:
1. 细胞存活/增殖检测:通过细胞存活或增殖的评估来检测细胞对药物的敏感性。常用的方法包括MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基) -2,5-二苯基四唑)实验、细胞计数、SRB(硫酸罗丹明B)染色等。
2. 流式细胞术:通过使用荧光染料或特定标记的抗体,测定细胞表面标志物或内部分子,以评细胞耐药性。
3. 荧光染色:使用荧光标记染料或融合蛋白来检测细胞内药物的积累或细胞状态的改变。
4. 细胞周期分析:通过流式细胞术或细胞染色等方法,评估细胞在细胞周期不同阶段对药物的敏感性。
5. 克隆形成实验:将细胞分离成单个克隆,培养后暴露于药物,观察克隆的形成能力和生长情况。
6. 转染或基因敲除:通过转染耐药基因或敲除敏感基因来检测细胞耐药性的产生。
7. 3D细胞培养模型:使用三维细胞培养模型来模拟体内组织环境,更准确地评估细胞对药物的反应。
8. 基因组学分析:通过测序技术来研究细胞内基因表达的变化,寻找与细胞耐药性相关的基因。
9. 蛋白质组学分析:通过蛋白质组学技术,研究细胞内蛋白质表达的变化,从而了解细胞耐药机制。
这些方法可以单独或结合使用,以获得更全面的细胞耐药性信息。具体选择哪种方法取决于研究的具体目的和资源条件。
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可以用添加药物的培养基进行耐药性筛选。
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目前常用的检测耐药的方法有:(1)测定细胞内柔红霉素浓度其原理是DNA具有荧光,用它与患者新鲜白血病细胞共同温育,利用HPLC或流式细胞仪(FCM)测定细胞群体或单个细胞内DNR荧光强度◦耐药细胞内DNR浓度一般比敏感细胞低20%〜60%。
(2)检测mdrl基因检测细胞中mdrl基因及mdrl、mRNA在多药耐药细胞中呈阳性。(3)检测P170用与P170特异反应的单可隆抗体检测细胞膜P170表达,P170表达与白血病细胞耐药性有一定相互关系。
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一般包括涂片检测、细菌培养检测等。 首先细菌培养检测就是取标本在培养基上均匀分布, 然后培养细菌,继而可以通过显微镜的镜检判断是哪一种细菌。其次涂片检测是用痰液直接做成标本,通过显微镜检查来观察里面成分的成分的检查项目
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(1)常规药敏试验
(2)特殊耐药机制的检测
(3)耐药流行病学分析
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