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关于胃癌细胞的EMT的wB

相关实验:胃癌形态学观察实验

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安琦之家

胃癌hgc27 和ags可以做EMT吗?最近在跑E-cadherin用过CST的1:1000和abcam(1:3000-1:5000)都试过,都出不来。拜托大家帮帮忙

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3 个回答

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汤姆卜丽波

有帮助

可以做出来啊,是不是你的细胞本身状态不好,一般来说都可以做出来

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loveliufudan

有帮助

有以下建议:

1. HGC-27和AGS细胞株原则上都可以用于EMT研究,文献报道两者均可诱导产生EMT变化。

2. E-cadherin作为重要上皮标志物,表达量可能较低,导致WB检测困难。可以考虑同时检测下调的间质标记蛋白如纤维连接蛋白(Fibronectin)。

3. 优化E-cadherin抗体稀释度,建议抗体公司推荐的稀释度再稀释2-5倍,找到最佳工作浓度。

4. 增加样本总蛋白量,一般EMT样本加载50-100μg蛋白。

5. 检测不同状态细胞:上皮型对照需表达高水平E-cadherin;间质型表达应很弱或阴性。

6. 免疫荧光可直接观察E-cadherin在细胞间的表达和定位分布。

7. 尝试不同抗体品牌,有可能原试剂问题。按说明书配制稀释抗体。

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huarenqiang5

有帮助

胃癌hgc27和ags可以做EMT。

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