安琦之家
胃癌hgc27 和ags可以做EMT吗?最近在跑E-cadherin用过CST的1:1000和abcam(1:3000-1:5000)都试过,都出不来。拜托大家帮帮忙
星空之眸
请问你跑出来了吗 我也是一直跑不出HGC27的E-ca和N-ca
汤姆卜丽波
可以做出来啊,是不是你的细胞本身状态不好,一般来说都可以做出来
loveliufudan
有以下建议:
1. HGC-27和AGS细胞株原则上都可以用于EMT研究,文献报道两者均可诱导产生EMT变化。
2. E-cadherin作为重要上皮标志物,表达量可能较低,导致WB检测困难。可以考虑同时检测下调的间质标记蛋白如纤维连接蛋白(Fibronectin)。
3. 优化E-cadherin抗体稀释度,建议抗体公司推荐的稀释度再稀释2-5倍,找到最佳工作浓度。
4. 增加样本总蛋白量,一般EMT样本加载50-100μg蛋白。
5. 检测不同状态细胞:上皮型对照需表达高水平E-cadherin;间质型表达应很弱或阴性。
6. 免疫荧光可直接观察E-cadherin在细胞间的表达和定位分布。
7. 尝试不同抗体品牌,有可能原试剂问题。按说明书配制稀释抗体。
huarenqiang5
胃癌hgc27和ags可以做EMT。
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