dxy_bnntmv9
用ISO去诱导小鼠心肌成纤维细胞(Mcfs)造心肌纤维化模型,然后做QPCR看a-SMA的值,老是不成功,用的六孔板,每孔里加2ul 15uM的ISO,我加大了剂量,也还是不成功,我都要哭死了,主要是之前造模成功过,ISO也是新配的呀,请教各位大佬
dxy_9g3b17i8
有没有用这个造动物模型的?造动物模型的时候用依那普利干预组的大鼠容易死亡
悬崖边上的百合
同学,你好,我想请教一下你的ISO纤维化细胞模型具体干预条件是?我是ISO10uM干预成纤维细胞48小时然后收蛋白跑WB,但是纤维化指标没有上调反而下调,最近还在重复
loveliufudan
以下是可能的解决方法和建议:
1. ISO浓度和处理时间:你提到使用了2uM的ISO浓度,这可能需要进一步优化。尝试使用ISO的不同浓度范围,例如1-10uM,并确定最佳浓度。此外,根据文献或先前成功的实验,确定ISO处理的最佳时间,可能需要尝试不同的处理时间点。
2. 细胞培养条件:确保你的MCFs在培养过程中处于理想状态。维持适当的细胞密度、培养基组分和培养条件(如温度、CO2浓度等)。
3. 实验设计:确认实验设计中的每个步骤是否正确。确保你的试验组和对照组设置正确,并进行合适的重复。
4. RNA提取和qPCR技术:确保从细胞中提取高质量的RNA,并进行适当的RNA逆转录和qPCR实验。验证你的引物和控制物质是否正确,并根据标准曲线进行定量。
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