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免疫组化抗体浓度一般怎么设置呢?

相关实验:小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验

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娜娜默默

  1. 免疫组化抗体浓度一般怎么设置呢?一抗1:100或1:200或者还有什么浓度可以先要摸索一下么?一般摸索到浓度范围是什么呢?
  2. 山羊血清封闭和bsa封闭有什么区别呢?都是10%浓度吗?
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3 个回答

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huarenqiang5

有帮助

免疫荧光的一抗浓度一般高于免疫组化的一抗浓度,但是也要看具体情况:因此免疫荧光一般采取二步法,而免疫组化中有biotin放大这一步。所以建议免疫荧光的时候重新摸索浓度,要是采用三步法可能不需要摸索了。另我们免疫荧光抗体一般用推荐浓度。免疫荧光抗体浓度要根据免疫组化结果的强弱调整,如果较强,用相同浓度即可;如果组化阳性较弱,那么做荧光时要加大抗体浓度。至于免疫组化的抗体是否能做免疫荧光,其实是由组织类型及标本的固定方式决定的。一般组化为石蜡切片,荧光为冰冻切片或细胞爬片。如果组化和荧光用的是相同的标本,那么抗体就能通用,毕竟组化和荧光的区别在于一抗的呈现方式,而非抗原抗体的结合。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

我一般用bsa封闭,10%浓度就可以,效果比血清好。

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juyue2010

有帮助

一般按照抗体说明书推荐浓度去稀释,若不成功,再围绕这个稀释比,2倍设置梯度

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