请问，流式配色时，如何为难染色的分子，挑选出最合适最强的color？谢谢

流式细胞仪是同时检测多种荧光的，这些荧光之间可能存在干扰。我们需要根据流式细胞仪的通道，来确认有哪些荧光素可以选择，这样可以在后期搭配的时候，尽量避免干扰。在已确定 Marker 的强弱，和流式细胞仪可检测的荧光素的强弱后，我们要遵循「强弱搭配原则」，进行配色。

强表达抗原 CD3，选择弱荧光素 FITC 或强荧光素 APC，对实验结果影响不大。

弱表达的抗原 CD25，选择弱荧光素 PerCP，会导致阴阳性细胞群分不开。如果选择强荧光素 PE，可以看到明显的阳性细胞群。

当然，在配色时，也会遇到一些其他的问题，如：细胞样本有自发荧光、细胞处理容易出现死细胞（需要额外增加死活细胞染料）等。因此，我们需要特别注意，将对应通道的荧光检测信息，预留给自发荧光，或者死活染料检测。