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cas9基因编辑两种剪接本

相关实验:基于 CRISPR/Cas9 系统的动物基因敲除技术

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协和再爱我一次

某基因有A B两种剪接方式,不同剪接方式产生不同RNA和蛋白质。该基因有10个外显子,A缺乏第8个外显子,B缺乏第9个外显子,其他外显子二者都有。

现需要得到A突变体,则在第8个外显子上设计靶点做crisper cas9基因编辑,得到不同突变类型。

若需要A突变,而B的表达不受影响,需要筛选什么样的突变体?缺失3的倍数的碱基的突变体?还是无所谓缺失几个碱基,在外显子尾端最后碱基不变就可以?

如需检查B的表达是否不受影响,有什么方法?qPCR验证第9个外显子确实表达出了RNA?

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