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薄层色谱分析壳寡糖,重复不出来怎么办呀?

相关实验:糖的硅胶 G 薄层层析实验

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dxy_84bkvyq0

请问各位,我用薄层色谱分离壳寡糖(聚合度3-7),展开剂异丙醇:水:氨水(40:30:3),显色剂是0.3%茚三酮溶液。第一个点是氨基葡萄糖盐酸盐(10mg/ml),第2个是壳寡糖(1mg/ml),第3个是壳寡糖(1mg/ml)点了两次,第4个是壳寡糖(10mg/ml),第5个是壳寡糖(10mg/ml)点了两次。第一个板是跑了一次(展距6.5cm)没有跑出来,我又把它放进展开剂中又跑了一次(展距8cm),能看到糖分之间分离还是挺好的,就是点不太明显。我就又跑了一遍,但是效果又不太好,看上去成一条线,第三个板我就把浓度降低到5mg/ml.,但是还是不行,请问有人知道这是什么问题吗,我该怎么去调整呀

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4 个回答

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sswei

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薄层色谱分析重员不出耒主要是展开剂有无变化,还有就是板子,再其次考虑温湿度,所以需要针对上述情况改进。

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huarenqiang5

有帮助

主要考虑以下几点原因:

1.进样技术不佳

2.检测器处漏气

3.载气(氢气,分流)阀不稳在进样的线性范围外进4.样气化垫漏气进样器坏

5.色谱柱严重流失或污染

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毛利小五郎的徒弟

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第一次考虑展开不充分建议延长时间

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dxy_84bkvyq0user-title

您好,意思还是展距8cm,让他多跑一会儿还是将展距调长一点呀?

第一次还能跑出斑点,后面几次就跑出来一条线,我查的说是超载了,将浓度调低之后仍然是一条线,而且浓度越低颜色越淡了,是样品的纯度不太够吗?

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loveliufudan

有帮助

如果重复跑薄层色谱结果不一致,可能有以下原因:

样品制备出现差异:样品的制备方法可能影响分离结果。建议在样品制备方面尽量保持一致,比如加入相同量的显色剂,同时也要注意样品的保存和稳定性。

展开剂成分出现变化:如果不同批次的展开剂成分存在差异,也会影响薄层色谱的结果。因此,建议在一个实验过程中使用相同批次的展开剂。

显色剂不同批次表现不同:不同批次的显色剂可能存在差异,因此也建议使用同一批次的显色剂。

涂层不均匀:涂层的均匀性对于分离结果很重要,如果涂层不均匀,那么就会出现一些斑点过淡或过重的情况。因此,建议在涂层前将硅胶板预处理,并在涂层时尽量保持涂层均匀。

试剂过期或质量不佳:过期或质量不佳的试剂可能会影响薄层色谱的结果,建议使用新鲜的试剂并按照使用说明存放。

总之,调整薄层色谱的条件需要从样品制备、展开剂、显色剂、涂层均匀性以及试剂质量等多个方面入手,逐一排查可能的问题,找到最适合的条件。同时,建议在每次实验前做好实验记录,包括展开剂的配制、样品制备、涂层等条件,方便后续复现实验。

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dxy_84bkvyq0user-title

已经解决了,换了展开剂可以了

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