DNA斑点杂交加底物溶液为什么30min内甚至7小时都无斑点？是静止孵育吗

可能是阻断封闭不足，建议将经过杂交和严格清洗后的膜用马来酸缓冲液漂洗1~5min；将膜在l00ul阻断液中孵育30min。

有几个可能的原因：

1. 未充分孵育：斑点形成需要足够的时间，孵育时间可能需要延长。您可以尝试增加孵育时间，观察是否能够观察到斑点的出现。

2. 互补性问题：如果探针DNA与目标DNA的互补性不足，可能会导致结合不充分，从而无法形成明显的斑点。确保探针DNA与目标DNA序列之间存在足够的互补性。

3. 实验条件问题：实验条件如温度、缓冲液pH等可能会对DNA斑点杂交结果产生影响。确保实验条件的准确性和适当性，例如温度是否适合结合和杂交的过程。