斑点杂交实验

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2023-05-23

合作专家 | 曾倩晖博士

动物遗传育种繁殖华中农业大学

审核专家 | 聂壹峰博士

纳米生物医学中国科学院大学

简介

斑点杂交（dotblot）是一种检测、分析和鉴定 DNA、RNA 和蛋白质的技术，通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度。作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 RNA 转录后修饰，m⁶A 修饰能够调控 RNA 的剪接与转运、稳定性、出核和翻译成蛋白质的效率。因此在研究 RNA 的 m⁶A 修饰时经常用到斑点杂交来对细胞内总 RNA 的 m⁶A 修饰水平进行定性或半定量分析。

原理

m⁶A 斑点杂交是指将待测的 RNA 变性后点加在硝酸纤维素膜或 NC 膜上，紫外交联固定后用 m⁶A 抗体进行杂交，洗膜，放射自显影，以斑点有无或颜色的深浅代表 m⁶A 修饰水平的高低。

来源：

操作方法

🔥 m6A 斑点杂交

斑点杂交（dotblot）是一种检测、分析和鉴定 DNA、RNA 和蛋白质的技术，通过显影斑点的有无及颜色的深浅来判断是否有杂交及其杂交强度。作为目前高等真核生物和植物中最丰富的一种 RNA 转录后修饰，m6A 修饰能够调控 RNA 的剪接与转运、稳定性、出核和翻译成蛋白质的效率。因此在研究 RNA 的 m6A 修饰时经常用到斑点杂交来对细胞内总 RNA 的 m6A 修饰水平进行定性或半定量分析。