请问下各位师兄师姐，为什么affinity同一种一抗 对应的分子量不一样

因为会有相似的肽链结构，所以位置并不是单一的。

可能有几种原因导致相同分子量的蛋白在Western blotting中出现在不同的位置：

抗体的特异性不同：即使使用相同的一抗，如果一抗与不同的肽段结合，可能会导致相同蛋白的不同带位置。另外，如果一抗对同一蛋白的结合特异性不同，也会影响Western blotting结果。

单克隆抗体与多克隆抗体的差异：单克隆抗体可以更加特异地结合目标蛋白，因此可能会导致Western blotting结果中出现更多的细节。而多克隆抗体则可以识别多个蛋白表位，因此可能会显示出更多的非特异带。

电泳条件的影响：不同的电泳条件，如电泳电场、凝胶浓度等，可能会影响蛋白的迁移速度和带位置。

总之，不同抗体之间的差异、抗体与蛋白的结合特异性、电泳条件等因素都可能会导致Western blotting结果中相同分子量的蛋白出现在不同的位置。