杂交瘤克隆化

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

杂交瘤克隆化主要用于（1）将抗体阳性孔进行克隆化。（2）将抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体（特异性抗体）分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞分离开。

来源：丁香实验

操作方法

有限稀释法

1.克隆前1天制备饲养细胞层（同细胞融合）。2.将要克隆的杂交瘤细胞从培养孔内轻轻吹干，计数。3.调整细胞为3——10个细胞/ml.4.取头天准备的饲养细胞层的细胞培养板，每孔加入稀释细胞100μl.孵育于37℃、5%CO2孵箱中 .5.在第7天换液，以后每2-3天换液1次。6.8-9天可见细胞克隆形成，及时检测抗体活性。7.将阳性孔的细胞移至24孔板中扩大培养。8.每个克隆应尽快冻存。