分选纯度的影响因素有哪些？

标本制作要轻柔，最好提前做个预实验，不要上来就直接做

1.选择合适的进样速度；2.团块影响和门的设定

被分选细胞的性质

仪器的精密度

被分选细胞的数量

其他细胞的数量相关

分选细胞与其他细胞有无相互重叠的生物学特性

1.液滴的分选模式；2.确保液滴延迟时间准确

1.分选速度：振荡频率（频率越高，速度越快）、鞘液压力、喷嘴大小、上样速度(速度过快，得率会降低，故应该按实验需求来设定)

2.分选纯度：精确设定液滴延迟时间（跑微球去矫正）、保证液流稳定、选择合适的分选模式、排除样本粘连、合理设门（用散点图）、合理阈值设定

3.分选得率：液滴延迟时间要准确、液流稳定、如果不考虑纯度的情况下（不需后续培养），可以选择Enrich/yield分选模式

4.分选活性：细胞本身的活性、仪器洁净程度、鞘液压力、喷嘴大小（对于脆弱细胞，尽量采用低压和大喷嘴，包裹细胞的液滴越大，对细胞的冲击越小）、上样管路设计及管壁光滑程度