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通常情况下,不建议直接将含有高浓度尿素的蛋白用于动物免疫免疫,因为高浓度尿素会对动物产生毒性影响,可能会导致免疫反应异常或不良反应。同时,尿素也可能与蛋白质结合,影响蛋白的二级、三级结构和免疫原性。
为了克服这些问题,可以采用以下两种方法:
尝试将蛋白在含有较低浓度尿素的缓冲液中进行重折叠和重组,以使其回复到天然构象并增强免疫原性。在纯化过程中,可以逐渐降低尿素浓度,并将其转移到合适的缓冲液中,最终得到一个适合用于免疫免疫的纯蛋白。
将蛋白在不含尿素的缓冲液中进行免疫免疫,并在后续步骤中逐渐将其浓度增加到允许的范围内。这种方法需要在免疫反应中增加对目标蛋白的特异性和灵敏度,并且可以避免高浓度尿素对动物产生的毒性和不良反应。
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可以梯度接种,8m,6m,4m进行接种