Eason老歌迷
可以试一试Protein A和protein G纯化法。基本原理就是protein A和proteiin G 可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合。Protein A和protein G 作为配基可以被偶联到琼脂糖凝胶上,当抗血清从中流过时,特异性的IgG就与配基结合,其他杂蛋白则穿流而过。因两种蛋白纯化抗体时对不同宿主的抗体的结合能力不同,我们需要具体情况具体对待,分别选择protein A 或者protein G,或者是protein A/protein G组合。一般推荐小鼠单抗IgG2a,IgG2b,IgG3,兔,人,猪的多克隆抗体用protein A纯化,而小鼠单抗IgG1, 大鼠单抗,小鼠,大鼠,山羊的多克隆抗体则选择用protein G纯化。
疏影
量较小,可以考虑免疫亲和纯化法将抗原作为一种配基偶联在sepharose 4B上,血清等生物液体中的特异性抗体与sepharose 4B上的抗原进行特异性结合,其他杂蛋白和杂抗体则不被结合,通过洗涤和洗脱等一系列实验步骤即可得到高纯度的目标抗体。
毛利小五郎的徒弟