蜡样芽孢杆菌涂板培养18个小时，有小的菌落，是否为杂菌污染？

这个看着，我感觉并不是杂菌污染。

考虑污染，看看实验流程中，器械，操作有没有导致污染可能。或者选用的抗生素种类，量的问题？再一个就是抗生素耐药问题！

芽孢涂板后生长的大菌落为菌体直接生长产生的，小菌落可能为孢子产生，生长较慢。

这些菌落被称为卫星菌落，做完转化子后，如果你的抗生素浓度有些低的话，或者涂板不均匀的话，或者你加入的时间过早，部分抗生素失效的话，会有许多卫星菌落长出来，他们通常在转化子的周围，因为转化子把它周围的抗生素消耗完了，所以它的周围就会长出不是转化子的单菌落。尤其是用氨苄霉素的时候，最容易出现。用卡那霉素的时候，很少出现

这些是卫星菌落，其实并不会非常影响你的实验的，因为他们摇起来在抗生素的LB中是无法生长的。建议你可以考虑在制造平板的时候，就在平板里面的LB中加入氨苄霉素，这样可以一定程度上抑制卫星菌落。