Elisa实验本底颜色太重什么原因？

1、实验过程中洗涤不充分，洗后未拍干，样品观中其他成分残留或酶标记物残留

解决办法：充分洗涤，静置15秒，彻底拍干。加样和加酶的拍板的滤纸应弃去不用，不要重复使用，以免被污染。

2、样品稀释液污染

解决办法：弃去稀释液，重新配置。

3、没有正确封闭

解决办法：在样品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间

就知道这么多，求其他解答。

1、HRP的错误稀释

HRP浓度过高会造成高背景色，因此要严格按照产品说明书稀释。

2、错误的孵育时间和温度

必须严格按照产品说明书来定孵育时间和温度。

3、包被板保存不当

如果包被板只用了一部分，一定要正确保存剩余的板条。

1、不正确的洗涤

洗涤不充分或省略洗涤步骤中的任何一步均会导致背景色过高。

解决方法：检查洗涤缓冲液的体积并确保完成所有的洗涤步骤；确保洗涤缓冲液的正确稀释和正确使用。

2、底物污染

确保在使用前，底物不被金属离子或氧化剂污染；在实验时留存一些额外的底物，底物本身不应该有颜色。

3、底物曝光

底物曝光会使底物变成蓝色，因此在加入板内之前要保存在暗处(即试剂瓶内)。