Lucky___
求助
我用胆固醇造膜,MTT检测胆固醇不同浓度细胞存活率,为什么检测出来的细胞存活率没有多大差别,我看文献大概是10umol/mL是最合适的,可是为什么我测了好几次都差别不大,也不在合适的范围,细胞用的HUVECs。
土井挞克树
10umol/l的胆固醇考虑浓度有点小了,建议提高浓度
loveliufudan
在使用胆固醇造膜并使用MTT检测胆固醇浓度对细胞存活率的影响时,存在一些可能导致你观察到的细胞存活率没有明显差异的原因。以下是一些可能的解释:
1. 浓度范围选择:可能你选择的浓度范围过于窄,未涵盖到影响细胞存活率的有效范围。如果你只测试了几个特定的胆固醇浓度,可能错过了细胞存活率受浓度变化的敏感范围。尝试使用更广泛的浓度范围进行实验,以确定是否存在浓度相关的效应。
2. 时间因素:胆固醇对细胞的影响可能需要一定的时间来展现。你可能需要考虑延长实验时间,以便观察到胆固醇对细胞存活率的潜在影响。不同时间点的细胞存活率可能会有所不同。
3. 细胞类型差异:HUVECs(人脐静脉内皮细胞)可能对胆固醇的响应具有一定的个体差异或特异性。胆固醇的效应可能因细胞类型的不同而有所变化。建议与文献中使用HUVECs的研究进行比较,以便更好地评估你的实验结果。
4. 测量方法的限制:MTT检测细胞存活率是常用的方法,但它并不能提供详细的细胞功能或机制信息。其他细胞存活率的检测方法,如荧光染色或细胞凋亡标记物的检测,可能提供更全面的评估。考虑尝试其他细胞存活率检测方法来验证结果。
总而言之,细胞存活率的差异可能受多种因素影响,包括浓度范围、实验时间、细胞类型和检测方法的选择等。进一步的实验设计和探索可以帮助你更好地理解细胞对胆固醇浓度的响应。
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