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细菌电转所用质粒如何选择?

相关实验:电转化流程

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dxy_cffftvqr

我想问下电转化实验中质粒的使用是否因菌种革兰氏阳性或阴性不同而要用不同质粒?若是需要,那是为什么呢?我看有的质粒有标革兰氏阳性阴性。

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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

需要用不同极性的质粒,质粒的极性对电转影响很大,细菌的电转如果使用不合适极性的质粒,会导致电转失败

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dxy_cffftvqruser-title

您好,请问什么是质粒的极性啊?我没找到定义。谢谢你

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huarenqiang5

有帮助

电击转化时通过瞬时高压使细胞表面出现微小的孔洞,从而使外源DNA能通过孔洞进入到细胞里面,一般适用于革兰氏阳性细菌或者真核微生物;

热激转化是使用钙盐或者镁盐溶液在低温状态下处理细胞使其处于感受态状态,然后通过短时热激使其吸入外源DNA片段,主要应用于革兰氏阴性细菌。

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dxy_cffftvqruser-title

我看电转化也可以用于革兰氏阴性菌呀,还有就是我问的是质粒会有什么不同吗?我看有的会换复制起点。谢谢您的回答。

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Dr_劉医生

有帮助

会有影响,但不是电转质粒的重点,只要质粒DNA能够进入细菌,细胞能够处于感受态状态就行。

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