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C2C12细胞转染效率低

相关实验:细胞转染

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dxy_qk7ynzlq

最近做C2C12细胞的慢病毒转染,24孔板种了10^5个细胞,1天后转染病毒,转染24小时后换液。设置了MOI的梯度和对应的polybrene对照组。说明书上说转染72-96小时后能看到荧光。但是现在96小时过去了,一点荧光都没有,为啥呀

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3 个回答

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哼宝Henry

有帮助
  1. 转染时细胞密度是多少?60%左右最佳
  2. 转染试剂是否有问题?
  3. 接种的细胞数偏少
  4. 看荧光是否时间太长导致?荧光是否淬灭?
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毛利小五郎的徒弟

有帮助

首先接种的有点少,提高接种量。

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huarenqiang5

有帮助

从以下几点找一下原因:

1.质粒DNA或混和液中含有血清。

2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优

3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好

4.转染试剂选择不当。

5.细胞密度不是最优,优化细胞密度。

6.混和加入细胞中不含血清。在转染过程中使用含有血清的培养基,细胞状态良好有利于转染效率的提高。

7 .转染体系中含有抑制物。

8.转染试剂保存不正确,转染试剂保存在4℃。

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