C2C12细胞的分化心得
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原来是担心细胞状态不好,所以是分别从两个地方要来的细胞,做这个细胞的分化做了小半年,一直在换各种诱导方法,怎么都诱导不起来,细胞只是一个劲儿疯长,怎么都不分化,诱导方法和细胞密度都做出个矩阵来,都找不到合适的条件。
后来一咬牙直接去购买了一株,做了两次就做出来了。
总体来说:
1. 定要用代数低的细胞,有条件就购买好了,几百一株,不贵;
1. 定要用代数低的细胞,有条件就购买好了,几百一株,不贵;
2. 是诱导密度最好控制到80%,千万不要密度低;
3. 不一定三天就可以分化,我的到第五天才分化;
4. 如果你手上的C2C12加入分化的培养基还一个劲的长,就不要用了,我后来可以分化的细胞,加入了分化培养基以后,是不怎么长的;
5. 这个细胞会在密度80%左右的时候,突然出现爆发的情况,就是几个小时内突然的长到100%,而相互接合是这个细胞去分化的最大的原因,所以无论如何,70%左右就可以传代了。