提问
提问
我要登录
|免费注册

红色荧光蛋白质粒转hek293t不亮怎么办

相关实验:细胞转染

user-title

dxy_n4jex0k8

质粒用的是碧云天pCMV–C-DsRed,基因大小七百多,测序正确,且质粒dsred自带atg。

用碧云天lipo8000转染

48h后染色,空载红色荧光有一点点点,重组载体基本没有,用细胞爬片,红光亮度90%,40X也看不见。但是dapi染很好,绿色荧光蛋白也很亮,细胞也没有叠在一起。

除了是质粒提取纯度问题影响转染还会有哪儿踩坑了呢?

求大神救救孩子

wx-share
分享

4 个回答

user-title

bamboopiggy

有帮助

可能是你质粒构建有问题,尤其是diRed,容易产生移码,先检查质粒,如果没有问题,可以进行流式分选后,再做。

user-title

汤姆卜丽波

有帮助

可能还是转染没转上,先试试转个细菌拍一下有没有信号,再转293

user-title

balalaLy

有帮助

转染试剂或者细胞状态不好也会影响转染效率

user-title

天一湖医者

有帮助

可能是padtrack-cmv上一个表达信号出了问题,建议重新试一下

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序