细胞增殖检测细胞浓度问题？

细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平。比如做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较。后来换用 10000/ml,结果就很好。当然细胞数也不能太多,这其实取决于你细胞的生长速度,生长快的细胞,可接种浓度低点。这主要是使细胞增殖率不致受处理因素之外的其他因素影响,比 如接触抑制,营养竞争。总之,做MTT时细胞数应较低,目的就是为了排除其他因素的影响,以使每孔细胞生长情况尽可能地反映出处理因素的影响。细胞接种的浓度和你的实验目的、要求、细胞种类、处理因素的特殊要求都有关系。没有简单的,每孔接种多少的一个标准。当然,可以用楼上建议的浓度开 始摸索。同时,注意肿瘤细胞核正常细胞的生长数度也不一样,前者生长快,后者慢,细胞数的量也有讲究。到底多少合适,得根据你的实验具体要求来摸索。我做 b16转染时,因为脂质体要求细胞融合度为30%-50%,曾经没孔接种过300-500个细胞,效果非常好,

悬浮细胞通常是4x10 4/ml ，贴壁细胞通常是5x10 4/ml

选择适当的细胞接种浓度，常用10000个/ml。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有100000个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。

先做预实验，不同的细胞不一样，并且看你是做growth curve还是药物抑制