BL21中诱导膜蛋白表达

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2024-07-13

请问在BL21中诱导一个带GST标签膜蛋白的表达，一共110kD。目前试了37℃ 200rpm诱导5h，设置了从0到2mM的iptg。每次诱导后先取了一些菌液离心，然后加loading吹打后100℃煮10min，然后先进行SDS PAGE检测有没有目标蛋白，但是一直没诱导出来。

帮师姐诱导的一个线粒体内膜上的蛋白，也是加了GST后110kD左右，25℃ 16h一次就诱导出来了，我自己的蛋白也试了这个条件，但不行。

请问这样直接煮菌体，能将包涵体的中的蛋白也煮出来吗？另外，求一个诱导办法！

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