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蛋白定位在真菌细胞壁上,做WB一直检测不到,请问该怎么解决啊,有没有大神给一些建议,谢谢!

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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蛋白大小17kDa,用的碧云天RIPA强裂解液,加了loading buffer分别试了煮沸后电泳和37℃水浴后电泳,半干转20v15min,一抗1:3000,二抗1:5000,最后显影的时候什么条带都没有,干干净净。

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