sds-page条带模糊是为什么？

跑的是大肠杆菌发酵后的蛋白，小培养阶段的蛋白条带染色后都非常清晰，但是发酵后的包括第一次纯化之后和这次发酵后的包涵体蛋白条带都十分的模糊，染液电泳液都是新的，为什么这么模糊

用的是雅酶7.5％的胶，电泳液、marker、loading buffer以及考马斯亮蓝染液都是雅酶的，电压是80v左右压平（大概30min)，后续用120v跑。

目的蛋白是143kd左右。

一三是模糊的，第二个是小培养那会跑的，感觉第二个就明显比一三好一些。