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简介
按所用小型平板凝胶装置调整溶液体积,胶板大小约在 8X10X0.15 cm。在此大小范围内有几种形式可以利用。制胶的装置有玻璃板、塑料隔条(通常厚度为 0.1~0.2 cm) 和铸胶时成孔用的 Teflon 梳子。下面逐步示教 SDS-PAGE 的操作程序。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
来源:丁香实验
操作方法
铸分离胶(下层胶) 装置的清洗 为使角蛋白的污染减至最少,将玻板、梳子和隔条浸泡在含强碱性去垢剂〔2%RBS 35 液(Pierce Chemical Co.)〕提浓物的水溶液(每 1000 ml 水加 20 ml 提浓物中。可将去垢剂溶液置于一带盖的盆中,盆中放一支架,将玻板悬置于支架上至少保持 10 min(或过夜)。此外,努力保持凝胶材料和溶液尽可能是无尘的。有时要用缓冲液对吸管进行预冲洗
蛋白质的 SDS-PAGE 电泳1、装置的清洗为使角蛋白的污染减至最少,将玻板、梳子和隔条浸泡在含强碱性去垢剂(2% RBS 35 液)提浓物的水溶液(每 1000 mL 水加 20 mL 提浓物)。可将去垢剂溶液置于一带盖的盆中,盆中放一支架,将玻板悬置于支架上至少保持 10 min(或过夜)。此外,努力保持凝胶材料和溶液尽可能是无尘的。有时要用缓冲液对吸管进行预冲洗,以除去可能沉积于吸管内的灰尘颗粒。操作时要一直戴手套并经常
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