丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

sds凝胶电泳上样时样品向上浮是什么原因啊?buffer和电泳液的浓度是配套的嘛

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

user-title

dxy_skbd15w0


wx-share
分享

2 个回答

user-title

百泰派克-李工

有帮助

SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)中样品向上浮的现象通常是由于以下原因造成的:

1、样品准备问题:

如果样品中含有大量的油脂或是有机溶剂,这些物质的密度可能低于水,导致样品在凝胶中上浮。确保样品在加入上样缓冲液后充分混合和加热,以保证蛋白质充分变性并与SDS结合。

2、上样技术问题:

在上样时,如果针头没有插入到凝胶的上样孔中,或者上样速度过快,可能会导致样品漂出上样孔。应缓慢、小心地将样品注入到凝胶孔中。

3、样体积过多:

如果上样量过多,超过了凝胶孔的容量,样品可能会溢出。确保上样量适合你使用的凝胶孔的容量。

此外,buffer和电泳液的浓度通常是配套的。SDS-PAGE使用特定的buffer体系,包括上样buffer、运行buffer和凝胶的制备buffer。这些buffer的pH值和离子强度对电泳过程中蛋白质的迁移有重要影响。使用不匹配的buffer可能会导致电泳效果不佳,例如蛋白质迁移不均匀、分辨率低或者条带模糊等问题。因此,建议使用配套的buffer体系,以确保实验的准确性和重复性。


user-title

dxy_vj7xqvze

有帮助

点样前,可以用水浴锅加热一下试试


提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序