蛋白纯化时，老是挂不上柱子是为什么呢？

在蛋白纯化过程中，如果蛋白质不能有效地吸附到柱子上，可能有几个原因：

1.缓冲液pH不适宜：

蛋白质的结合通常取决于其等电点和缓冲液的pH。如果pH不适宜，蛋白质可能无法正确结合。

2.盐浓度过高或过低：

盐浓度会影响蛋白质的溶解度和结合能力。如果盐浓度不适宜，可能会阻碍蛋白质的吸附。

3.柱子的问题：

柱子可能被堵塞或者失活。需要检查柱子是否正确存储和维护。

4.蛋白质的特性：

有些蛋白质可能因为其特殊的物理或化学特性而难以吸附。例如，非常疏水的蛋白质或者容易形成沉淀的蛋白质。

5.样品处理不当：

样品可能因为处理不当（如冻融循环过多、过度机械处理等）而导致蛋白质变性。

针对这些问题，可以调整缓冲液pH和盐浓度、检查和维护柱子、考虑使用更适合特定蛋白质的纯化方法，以及优化样品处理步骤。