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小分子蛋白(10KD)WB实验电泳液中不加SDS,但是wb不就是依靠SDS聚丙烯凝胶电泳的吗?如果不加SDS,是用tris填平吗

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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郑小虎DX3O


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5 个回答

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百泰派克-李工

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小分子蛋白(10KD)在进行Western Blot(WB)实验时,通常确实使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。SDS是一种表面活性剂,它的作用是使蛋白质变性并赋予蛋白质负电荷,使蛋白质按照大小进行分离。

如果你在电泳过程中不加SDS,蛋白质将不会完全变性,这意味着蛋白质的电泳迁移不仅受到它们大小的影响,还受到它们的形状和电荷的影响。这种情况下通常使用的是非变性电泳,或称为天然电泳。在非变性电泳中,蛋白质保持其原有的结构和电荷特性。

如果不使用SDS,通常会使用Tris-glycine或Tris-acetate缓冲体系,以维持pH值,但这并不会使蛋白质变性或赋予统一的负电荷。因此,如果你的实验目的是要根据蛋白质的大小进行分离,那么不建议省略SDS。如果你的实验目的是保留蛋白质的原始结构和功能,可以考虑使用非变性条件进行电泳。


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周末也要努力呀

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电泳可以加,转膜时候不加SDS,其剂量用tris补齐

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高山云初

有帮助

小分子蛋白Western转膜液中一定不要加SDS,因为SDS会影响转膜效果,分子量小于10 kDa的多肽或蛋白,建议使用Tricine-SDS-PAGE电泳和转膜系统

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sswei

有帮助

小分子蛋白(10KD)WB实验电泳液中不加SDS,是用tris填平

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

用tris对小分子蛋白的分离效果更好

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