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小分子蛋白(10KD)WB实验电泳液中不加SDS是可行的吗?如果不加SDS,那电泳液的配方是?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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郑小虎DX3O

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3 个回答

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huarenqiang5

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小分子蛋白电泳液中不需要加SDS。

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高山云初

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Western转膜液中一定不要加SDS,因为SDS会结合小分子蛋白的抗原位点。小分子的蛋白电泳建议选择15%分离胶,5%浓缩胶。正常配胶时,一个迷你垂直电泳仪的配制,5ml分离胶,2ml浓缩胶,跑正常分子量的蛋白是没有问题的。但是跑小分子蛋白,浓缩胶的长度要再长一些,最起码要保证三分之一浓缩胶,三分之二的分离胶,浓缩胶多,可以保证不同分子量的蛋白充分压缩到同一起跑线。

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周末也要努力呀

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小分子最好不要加SDS,使用甘氨酸和Tris就行了,把该加的SDS量附加加入到Tris配齐总量

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