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为什么在SDSPAGE电泳时,在浓缩胶层,溴酚蓝总是向四处扩散?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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青依N56K


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3 个回答

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balalaLy

有帮助

可以在溴酚蓝buffer中添加巯基乙醇

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huarenqiang5

有帮助

考虑:1.浓缩胶没起作用,是否用错了缓冲液,导致胶的pH不对,没有浓缩效应。

2.是不是凝胶聚合不好?样品两侧可以加一点loading buffer,压一下。

3.点样前可以冲洗一下点样孔。样品体积有些过多,可以减少一些。

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小小翻车鱼

有帮助

在浓缩胶中,溴酚蓝向四处扩散的现象可能有以下几个原因:

1. 浓缩胶浓度不合适:浓缩胶的作用是控制样品的分离,使得目标蛋白质在分离胶中能够更好地分离。如果浓缩胶浓度过低,可能会导致电泳过程中蛋白质迁移速度过快,从而使得溴酚蓝向四处扩散。

2. 电泳缓冲液不合适:电泳缓冲液的组成和pH值对电泳过程中样品的迁移速度和分离效果有很大影响。如果缓冲液组成或pH值不合适,可能会导致样品在凝胶中的迁移速度异常,从而影响溴酚蓝的迁移。

3. 电压或电流不合适:电泳过程中,电压和电流的大小会影响样品在凝胶中的迁移速度。电压过高或电流过大,可能会导致样品和溴酚蓝在凝胶中的迁移速度过快,从而使得溴酚蓝向四处扩散。

4. 凝胶制备问题:凝胶制备过程中的操作失误,如凝胶不均匀、孔隙过大等,可能会导致凝胶的电泳特性不佳,从而使得溴酚蓝在凝胶中的迁移异常。

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