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很可能你的蛋白没有转到膜上去。
周末也要努力呀
你可能蛋白没有转到膜上,建议根据分子量适当调整转膜时间。
小小翻车鱼
转印结束后,立春红染色没有蛋白条带,只有蛋白marker,可能是由以下几个原因导致的:
1. 转印不完全:转印是蛋白质印记的关键步骤,如果转印不完全,蛋白质可能会留在凝胶上,而无法转移到膜上。这可能是由于转印缓冲液不合适、电场强度不足或时间过短等原因造成的。
2. 封闭不完全:封闭是阻止膜上非特异性结合的重要步骤。如果封闭剂的质量或浓度不合适,或者封闭时间不足,可能会导致非特异性结合,从而影响蛋白质条带的显现。
3. 抗体孵育问题:抗体特异性结合是蛋白质印记的核心环节。抗体浓度、孵育时间以及孵育温度等条件都会影响抗体结合的效果。如果这些条件不合适,可能会导致抗体无法特异性结合到目标蛋白质,从而无法显现出蛋白条带。
4. 显色问题:如果显色剂的质量、浓度或者显色时间不合适,可能会导致显色效果不佳,从而无法观察到蛋白质条带。
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