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经 WB 检测,未检测到的蛋白,质谱可以检测到吗?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_svdiz512


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4 个回答

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学习是为了少犯错

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WB未检测到的蛋白有些是由于蛋白本身表达量低,抗体难以识别到,也有些是于抗体本身效价低等原因。对于质谱而言,其识别目标蛋白的原理与抗体不同,其可以检测到低丰度的蛋白,但是低丰度的蛋白信号容易被高丰度蛋白掩盖掉,可能需要通过富集或者分流分等前处理方法提高目标蛋白的相对丰度,再进行质谱检测。另外,WB未检测到的蛋白不一定是因为丰度低的原因,也可能是因为抗体效价低、样本中蛋白提取不充分或存在杂带掩盖等原因导致的,需要具体情况具体分析。

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sswei

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一般复杂样本中蛋白种类非常多,质谱检测并不能将所有蛋白质全部鉴定到,有些丰度含量较低的蛋白在质谱结果中不一定能够完整体现;Elisa/WB相比与质谱来说灵敏度不同,前者具有放大效应,抗体会对目标蛋白有一个富集效应,所以只要选对抗体,感兴趣的蛋白基本都会被检测到;而质谱结果中,如果目标蛋白丰度较低,在组学中未检测到也是正常的

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周末也要努力呀

有帮助

质谱一般是可以的,可以检测微量的浓度。WB检测不到可以更换抗体等,大部分还是可以检测到的。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

一般是可以的,质谱的敏感度更高,达到检测标准就可以

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