请大家帮忙，WB条带分析
杰杰O1TH
电泳:70V，1小时，100V跑到位置后停下，电泳液里面是新的，外面是旧的
转膜:电转液现配的。转膜43KDa转50min。139的转了1.5小时，转膜时候温度高，发烫，中途换了一次冰盒
封闭:10%脱脂牛奶，1h
一抗:4℃冰箱过夜（实验室不具备可以4℃摇床过夜）
二抗:1h
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3 个回答
feixue7758527w
有帮助
我觉得还是建议延长封闭时间，减少转膜时间，保证转膜的时候冰块充足的。
sswei
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减少转膜时间（通常 90V/1h，甚至更少），因为较小的蛋白质转膜速度会更快。或用封闭液稀释一抗。
杰杰O1TH
我抗体稀释是按照最低的比例稀释的，再用封闭液稀释一抗，也是可以的吗？
土井挞克树
有帮助
背景太高了，建议延长封闭时间或者更换封闭液
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