WB条带长短不一，该怎么调？

建议根据实际出来的内参结果调整上样量试试看。

对于WB条带长短不一的情况，我们可以尝试以下方法进行调整：

1. 改变电泳时间：如果条带过短，可以尝试增加电泳时间；如果条带过长，可以尝试减少电泳时间。

2. 改变电泳电压：如果条带过短，可以尝试增加电泳电压；如果条带过长，可以尝试降低电泳电压。

3. 改变样品浓度：如果条带过短，可以尝试增加样品浓度；如果条带过长，可以尝试减少样品浓度。

4. 改变样品加载量：如果条带过短，可以尝试增加样品加载量；如果条带过长，可以尝试减少样品加载量。

5. 检查电泳装置：如果以上方法都不起作用，可以检查电泳装置是否有问题，如电极是否均匀，电泳缓冲液是否正常等。

考虑是wb的条带上样量差异太大，建议调整上样量。

出现这样的结果，问题出在每一步都有一定的可能性，比如电泳，转膜，敷抗体，显色等等。但据我所知，WB 最关键的还是转膜和敷抗体步骤，可能是你敷抗体的时候敷的不均匀。我的建议是你再认认真真，仔仔细细做几遍，很可能重复性就做出来了。

条带长度不一致可能是由于以下几个原因造成的：

1. 蛋白负荷量不一致：不同样品或不同处理条件下的蛋白负荷量可能不同，导致条带长度的差异。确保在加载样品时，每个孔中的蛋白负荷量相对均匀，可以通过调整样品的稀释倍数或使用浓度标准品来标定蛋白负荷量。

2. 纯度和浓度差异：样品中的蛋白质纯度和浓度不一致可能导致条带长度的变化。确保样品处理过程中的一致性，如蛋白提取方法、洗涤和纯化步骤，以及样品存储条件的一致性。

3. 蛋白迁移不均匀：不同蛋白在电泳过程中可能迁移速度不同，导致条带长度的差异。调整电泳条件，如电流和时间，以确保蛋白能够均匀迁移。

4. 抗体特异性和结合效率：抗体的特异性和结合效率可能不同，导致特定蛋白的条带长度与其他蛋白不同。确保使用高质量、特异性好的抗体，并进行充分的洗涤步骤，以减少非特异性结合。

针对调整条带长度不一致的问题，你可以尝试以下方法：

1. 标准曲线校正：使用蛋白浓度标准品制作标准曲线，可以根据样品的相对蛋白负荷量来调整加载量，以使得不同样品的条带长度趋于一致。

2. 调整电泳条件：根据具体情况，适当调整电泳条件，如电流、电泳时间和电泳缓冲液的组成，以改善蛋白的迁移性能和条带长度的一致性。

3. 样品处理的一致性：确保在样品处理的每个步骤中保持一致性，如蛋白提取、洗涤和纯化过程，以减少处理步骤对条带长度的影响。

4. 检查抗体特异性和结合效率：确保使用的抗体具有良好的特异性，并进行充分的洗涤步骤，以减少非特异性结合对条带长度的影响。