动物肠组织WB不好跑

请问你用的是小鼠的结肠组织吗，匀浆的时候用的组织量是多少mg勒

动物肠组织要消化好，细胞的纯化度越高内参越容易跑，多种细胞混合内参很容易不齐，建议延长消化时间，提高细胞纯度

多半是做胶没做好导致的。一个是蛋白抽提后，没有认真去做蛋白定量，也就是没有大约摸定一下蛋白有多少浓度，导致上样量不一致。当然，就按照内参压出来的浓度来调整上样量就行了。不过，一定要注意的是，这个是在条带差距不大的情况下使用，要是真的内参差异特别大，还需要有别的考量。还有一种就是内参都特别深，没有比较的意义，WB压片也是有范围的，如果做标曲的话，也就是说尽量使用线性区范围浓度的上样量，别浓度太高，导致没法分析，这种时候需要降低点上样量。

首先，内参不稳定的问题可能与以下几点相关：

1. 内参的选择：对于肠组织，一般会选择β-actin、GAPDH或者Tubulin作为内参。需要注意的是，不同的组织、不同的处理方式，所选用的内参也可能有差异。一般来说，你可能需要试验多种内参来确定哪种最稳定。

2. 样本处理和蛋白质提取方法：尽可能快速冷冻组织以减少蛋白质降解。确保在提取蛋白质时的破碎充分，蛋白质完全提取。提取过程中尽可能低温并快速进行，以及添加足够的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。

3. 制备裂解液时要根据实验的需求来，有些研究可能需要用含有SDS的强裂解液，有些则需要用温和一些的裂解液。此外，裂解液中的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂也非常关键，能有效防止蛋白降解。

4. 蛋白质浓度的测定：BCA法测蛋白质浓度比较准确，但仍需谨慎操作，避免测定误差。

有关于“刮肠绒毛”的问题，刮肠绒毛的确能够获得更纯净的上皮细胞样本，从而可能使内参更加稳定。但是，这需要在动物实验阶段就进行操作，并且需要一定的技术手段，不一定每个实验室都能够进行。你提到的“肠内容物复杂，容易降解蛋白”的问题，实际上刮肠绒毛能够有效地解决。

内参不齐可以换其他内参试试看。