RAW264.7诱导破骨细胞

首先，对于未染色之前没有观察到典型的破骨细胞，可能是因为破骨细胞需要更长的时间来分化和形成。您在第6天进行TRAP染色，但有时需要更长的时间才能观察到明显的破骨细胞形成。您可以尝试延长培养时间，观察是否会出现破骨细胞的特征。

关于染色后出现很多小细胞呈红色的情况，这可能有几种可能的解释。首先，这些小红色细胞可能是RAW264.7细胞的前体或早期破骨细胞，它们正在分化并准备形成成熟的破骨细胞。这可以解释为什么在未染色之前您没有看到典型的破骨细胞，因为它们可能还处于早期分化阶段。

另一个可能的解释是，培养条件中的RANKL浓度可能过高，导致破骨细胞分化速度加快。这可能会导致较多的小细胞形成，但同时可能会减少破骨细胞的成熟程度。您可以尝试减少RANKL的浓度，观察是否会对破骨细胞的形成和成熟产生影响。

最后，您提到在之前的96孔板实验中也观察到了类似的结果。这可能说明您使用的培养条件或实验步骤中存在一些问题。建议您仔细检查实验步骤、培养基配方、细胞密度等因素，以确保实验条件的准确性和一致性。

是的，细胞浓度太高了，建议降低细胞浓度试试看。

你的细胞密度太大了，很容易培养失败，建议降低细胞密度再做