loveliufudan
可能是由于以下原因之一:
1. 高背景信号:M型条带可能是由于非特异性结合引起的背景信号增强。这可能是由于阻断步骤不充分、一抗或二抗的过度浓度、阻断缓冲液或洗涤缓冲液中存在污染物等原因。您可以尝试优化阻断条件、减少一抗和二抗的浓度、更换阻断和洗涤缓冲液,以减少背景信号。
2. 交叉反应:M型条带可能是由于目的抗体与非特异性蛋白结合引起的。这可能是由于目的抗体与其他蛋白共有的表位结构相互作用。您可以尝试更换不同的目的抗体,或进行前吸附试验以确定抗体的特异性。
3. 抗体失活或降解:M型条带可能是由于目的抗体的失活或降解引起的。这可能是由于存储条件不当、抗体老化或质量问题等。确保目的抗体的存储温度、保存时间和使用期限符合要求,并尽量避免多次冻融。
毛利小五郎的徒弟
考虑是一抗孵育时间太长了,建议减少孵育时间
sswei
可能一抗浓度太高或作用时间太长,蛋白量过大所致。