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做了一年WB,gpx4趋势做不出来,甚至是反的,求大神指点

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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woba

gpx4趋势不对,有没有大神可以帮忙解决一下

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

以下是可能导致此问题的一些原因和建议:

1. 抗体选择:确保您使用的GPX4抗体质量良好,并且已经进行了充分的验证。验证抗体的特异性和灵敏性非常重要,可以通过使用已知GPX4表达的阳性对照样本来验证抗体的有效性。

2. 样本制备:正确的样本制备对于WB实验至关重要。确保样本处理和蛋白质提取过程正确无误。使用相同的样本制备方法和条件来比较不同条件下的GPX4表达。

3. 蛋白负荷量:确认您加载的蛋白质负荷量是适当的。过高或过低的负荷量可能导致不准确的结果。尝试不同的负荷量范围来确定最佳负荷量。

4. 蛋白质电泳和转膜条件:优化电泳和转膜条件可以提高结果的准确性和可重复性。确保电泳条件(如电压和运行时间)以及转膜条件(如电流和时间)的准确设置。

5. 确认相关性:确认GPX4表达的趋势是否与您所研究的生物学问题相关。结合其他实验结果和文献资料,确保您正在研究的生物过程与GPX4的表达趋势相符。

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huarenqiang5

有帮助

可能是gpx4样本本身存在问题或浓度过低导致。

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土井挞克树

有帮助

gpx4需要设置合适的电压,我们之前用的abcam抗体,330mA,20min

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