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目的蛋白在不同温度的不同时间点均没有显著表达,目的蛋白大小约67KDa(红色Marker为70KDa),不知道接下来该如何摸索诱导条件
dxy_9f7mnbp2
我遇到了相类似的问题,我是16度诱导20小时,诱导不出来,设置了3个IPTG浓度梯度,分别为0.2 0.8 0.5mM,请问一下你的诱导出来了吗?
土井挞克树
可以优化一下iptg浓度,设置浓度梯度,摸索出最佳的iptg浓度
是TTT
诱导条件分为诱导温度、时间、诱导剂IPTG浓度。图中你已经做了温度梯度37、28、16℃。接下来还需要做每个温度的不同时间梯度,建议按照2、4、8、12小时设置。同时还有IPTG浓度,在0.1nm~1nm之间就行。
申东熙老伯
可以增加IPTG的浓度,设置梯度来优化条件。
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