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WB条带问题

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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五一五一呀

我跑的目的蛋白和内参都是左边这样的模糊弥散的条带。因为左右是不一样的样本,右边是降解了。那左边究竟是怎么回事?请大佬答疑解惑。

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3 个回答

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dxyc42u

有帮助

应该是转膜出了问题,没有转上。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

考虑是上样量不一致的原因,先把上样量平衡后再跑

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loveliufudan

有帮助

这种情况可能由以下原因之一或多个原因导致:

1. 溶解问题:模糊弥散的条带可能与蛋白质样品的溶解有关。如果蛋白质没有充分溶解或存在聚集现象,它们可能会在电泳过程中形成模糊的条带。确保在样品制备过程中充分溶解蛋白质,并采用适当的样品处理方法,如加入还原剂、蛋白酶抑制剂等。

2. 过度加载样品:如果你在电泳过程中加载了过多的样品,蛋白质可能会在蛋白胶上堆积,导致模糊弥散的条带。尝试减少加载样品的量,以确保样品能够均匀迁移并形成清晰的条带。

3. 电泳条件:电泳条件的选择和优化也会对结果产生影响。例如,电泳时间、电压和缓冲液的配方都可能影响蛋白质迁移的质量。确保使用适当的电泳条件,并对其进行优化。

4. 蛋白质降解或分解:你提到右边的样本是降解了的,左边的样本可能存在其他类型的蛋白质降解或分解。这可能是由于样品制备、储存条件、操作不当或其他因素引起的。确保在制备和处理样品时遵循正确的步骤和条件,以防止蛋白质的降解或分解。


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