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为什么coip中ip组对照组和处理组与input组蛋白结果相反?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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毛利小五郎的徒弟

为什么coip中ip组对照组和处理组与input组蛋白结果相反?

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3 个回答

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dxyc42u

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确认实验操作没啥问题的话,很有可能是把样本搞混了

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balalaLy

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一般input 和IP的结果应该是相同的或者input没差异,可能是操作上的误差。

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loveliufudan

有帮助

如果在Co-IP(共免疫沉淀)实验中,IP组(免疫共沉淀组)和对照组(通常是非特异性IgG控制组)与输入组(Inpu)的蛋白结果相反,可能有以下几个可能的原因:

1. 异常或非特异性的结合:IP组和对照组中的抗体可能存在非特异性结合或异常结合的情况。这可能导致误判或错误的结果。建议使用高质量的特异性抗体,以最大程度地减少非特异性结合的可能性。

2. 实验操作问题:在实验操作过程中,可能出现操作失误、试剂质量问题或技术误差等问题。请仔细检查实验步骤,确保操作的准确性和一致性。

3. 抗体特异性问题:IP组和对照组使用的抗体可能存在特异性或效率的问题。某些抗体可能对目标蛋白的结构或修饰状态较为敏感,而其他抗体可能不敏感或特异性较差。确保选择和验证抗体的质量和特异性。

4. 抗体交叉反应:在Co-IP实验中,使用的抗体可能存在交叉反应的情况,导致与预期结果相反。请确保使用的抗体对目标蛋白具有特异性,并检查其与其他蛋白的交叉反应。

5. 实验设计和数据解读问题:在解释Co-IP实验结果时,需要考虑实验设计和数据的背景。检查实验步骤、分析方法和数据解读是否正确,确保排除解读错误的可能性。


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