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wb检测细菌提取的蛋白,成像时maker显色了,可能哪里出问题了呢?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_j9cflss6

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5 个回答

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sswei

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绝大多是因为和2抗交叉反应导致形成的。

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loveliufudan

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WB检测过程中,如果胶上的marker显色了,可能的问题包括:

1. 染色步骤出现问题:通常情况下,标记蛋白不应当在成像过程中显色。如果这一步出现问题,可能是因为你在染色步骤中误用了某种试剂。

2. 二抗选择问题:如果使用了对所有蛋白都有反应的二抗(如抗鼠IgG二抗),可能会导致Marker也被二抗识别,从而在显色时出现颜色。

3. 非特异性结合:这可能发生在预混了二抗和标记蛋白的情况下。

解决这个问题,你可以首先确认你的染色步骤和所用试剂是否正确,然后检查你的二抗是否具有过高的非特异性,或者试着换一个二抗。最后,确保在转膜步骤和封闭步骤中充分洗涤,以避免非特异性结合。

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balalaLy

有帮助

marker显色可能是marker加得太多了,或者目的蛋白表达太低。

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dxyc42u

有帮助

排查下mark有没有保存不当。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可能是有蛋白污染了,建议去除污染源。

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