蛋白纯化

有可能是你的蛋白mark不准导致的

可能是形成聚合体了，所以跑出来的蛋白比较大

如果您在使用镍柱进行蛋白纯化时，发现蛋白的分子量与预期大小相差较大，可能存在以下几个可能的原因：

1. 构建蛋白的融合标签：如果您在目标蛋白上使用了融合标签，如His标签，这些标签的分子量会增加到蛋白的总分子量中，导致跑出的条带分子量大于预期大小。确保您考虑了融合标签对分子量的影响。

2. 蛋白的构象或修饰：蛋白的构象或修饰状态可能会导致其在SDS-PAGE凝胶中迁移的速率发生变化，进而影响分子量的估计。某些构象或修饰可能导致蛋白在凝胶中呈现较大的移动率。

3. 蛋白的聚合状态：蛋白可能存在聚集现象，形成聚合物或复合物，从而导致其在SDS-PAGE凝胶中显示较大的分子量。聚合物的形成可能受到蛋白浓度、缓冲条件或其他实验条件的影响。

4. 凝胶电场或迁移条件：不正确的凝胶电场或迁移条件可能导致分子量的不准确估计。确保您使用正确的凝胶百分比、电场条件和迁移时间，以获得更准确的分子量估计。

5. SDS-PAGE标准品：确保您使用了适当的分子量标准品作为参照物，以便准确估计目标蛋白的分子量。校正分子量可能有助于更准确地确定蛋白的实际大小。