老师们好，请问WB电泳液转膜液用太久了对结果有影响吗？原理是什么呀？

一般用过4、5次是没有问题的，用太多次会引入许多杂质，影响电流。

对于WB电泳液，一般是指凝胶电泳缓冲液，用于电泳分离蛋白样品。长时间使用的电泳液可能会发生一些变化，如缓冲液的pH值变化、离子浓度的变化以及某些成分的降解。这可能会对电泳分离的效果产生影响，如蛋白带的清晰度、分离效果和凝胶背景。

对于Western转膜液（也称为蛋白转印缓冲液），它是用于将电泳凝胶上的蛋白转移到膜上的缓冲液。Western转膜液通常含有特定的离子组成，以维持蛋白转印的效率和稳定性。如果Western转膜液使用时间过长，其中的离子浓度可能会发生变化，从而影响蛋白转印的效果，如转移效率和膜上的蛋白信号。

为了获得可靠和一致的结果，建议准备新鲜的WB电泳液和Western转膜液，并遵循实验室内部的操作规程和存储条件。

总体而言，使用过久的WB电泳液和Western转膜液可能会影响实验结果的一致性和可重复性。因此，为了获得准确和可靠的结果，定期更换和准备新鲜的试剂是一个好的实验实践。

一般认为转移液可以用3-5次,但是我都是用两次就换新的,感觉次数多了.就不好用了,容易导致转膜的时候转不上,或者使膜上的蛋白条带扭曲